اهداف درس: آشنایی با ابزارهای مولکولی و روشهای مختلف در دست ورزی ماده ژنتیکی.
مباحث درس:
-1مقدمه ای برعلم مهندسی ژنتیک: تاریخچه، کشف آنزیم های برش دهنده ،DNAاستخراج DNAاز باکتری، سلول های یوکاریوتی،
ویروس ها، استخراج RNAاز نمونه های زیستی
-2ارزیابی کمی و کیفی DNAو RNAاستخراج شده: اسپکتروفتومتری ،UVژل آگارز، تعیین غلظت ماده ژنتیکی
-3ملزومات دستکاری ژنتیکی: آنزیم های برش دهنده، انواع پرکاربرد وکتور های کلونینگ و بیانی در پروکاریوت ها و یوکاریوت ها
-4انتقال ماده ژنتیکی: ترانسفورماسیون، کانجوگاسیون و ترانسداکشن، روش های مبتنی بر وکتورهای فاژی و پلازمیدی، باکتری های
، competentروش های شیمیائی و فیزیکی انتقال ماده ژنتیکی در یوکاریوت ها
-5روش های انتخاب سلول ترانسفکت شده: مارکرهای انتخابی در پروکاریوت ها و یوکاریوت ها، انتخاب بر پایه مارکر، انتخاب بر اساس
پروب ها، انتخاب بر اساس محصول پروتئینی
:PCR-6اصول، انواع ،PCRانتخاب پرایمر اختصاصی، ایجاد جهش در DNAبا استفاده از ،PCRاصول و کاربردهای Real-time PCR
:Isothermal Amplification -7اصول پایه تکثیر DNAو RNAبدون استفاده از PCRو کاربردها
-8کتابخانه های ژنی: اصول ایجاد کتابخانه ژنی و انواع آن، کاربرد کتابخانه ژنی و غربالگری در آن
-9آنالیز توالی ژنتیکی: تعیین توالی DNAو ،RNAروش های نوین تعیین توالی، تعیین ماهیت ژنی یک توالی ( )ORFبه صورت In silico
In vitro و
-10کاربرد مهندسی ژنتیک: تولید پروتئین های نوترکیب در بسترهای گیاهی و جانوری، مزایا و معایب آنها
